به  گزارش  وبدای  دانشکده ، زهره  مهرداد پوردانشجوی  کارشناسی  ارشد رشته قارچ شناسی  از  پایان  نامه  خود با 

عنوان "شناسایی آلرژنهای آلترناریا آلترناتا در بیماران مبتلا به آسم مراجعه کننده به بیمارستان قائم مشهد با استفاده از روش ایمونوبلاتینگ" با راهنمایی استاد دکترعلی ناصری دفاع  کرد.

مقدمه: آلترناریا آلترناتا به عنوان یکی از منابع شایع آئروآلرژن، عامل بیماری های آلرژیک است که تقریبا از همه

مناطق آب و هوایی و اکثر نقاط دنیا گزارش شده است. مطالعات صورت گرفته نشان می دهد آلرژن های این قارچ نقش

مهمی در بروز و تشدید علائم بیماری آسم دارند. هدف از این مطالعه شناسایی آلرژن های آلترناریا آلترناتا در بیماران مبتلا

به آسم است.

روش کار: جمعیت مورد مطالعه، 70 بیمار مبتلا به آسم آلرژیک بودند که بیماری آن ها توسط متخصص آلرژی تایید شده

بود. هم زمان با آن ها 70 فرد بدون سابقه آلرژی نیز به عنوان گروه شاهد وارد مطالعه شدند. تست خراش پوستی و

خونگیری در مورد آنها انجام گردید. ایزوله قارچی تهیه شده از بخش قارچ شناسی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران در

محیط سابورو دکستروز آگار کشت شد. توده ی میسلیومی جمع آوری شده از پلیت های حاوی قارچ با استفاده از ازت

مایع و گلوله های شیشه ای شکسته شد، برای شکستن بهتر از دستگاه ورتکس استفاده شد. سپس پروتئین حاصل از نمونه

های اولترا سانتریفیوژ شده، بعد از تغلیظ اندازه گیری شد. با روش SDS-PAGE  تفکیک باندهای آلرژنی انجام گرفت.

برای شناسایی اجزای آلرژن از روش ایمونوبلاتینگ استفاده شد. اجزای آلرژن قارچ با سرم بیماران مذکور مجاور شدند و

باندهای پاسخ دهنده به IgE با آنتی بادی های ضد IgE  انسانی که به وسیله آنزیم نشان دار شده بودند، در مجاورت

سوبسترا به صورت رنگی نمایان شدند. اطلاعات به دست آمده با استفاده از نرم افزار SPSS نسخه 18، آنالیز گردید.

نتایج: از تعداد 70 بیمار آسمی مورد مطالعه ، 37 نفر(9/52 درصد) مرد و 33 نفر(1/47 درصد) زن بودند. سن

افراد بین 6 تا 61 سال بود که بیشترین افراد در گروه سنی 39-20سال قرار داشتند. 14 نفر(20 درصد) از بیماران

آسمی مورد مطالعه با تست پوستی نسبت به عصاره قارچ آلترناریا آلترناتا واکنش مثبت نشان دادند. در بررسی با روش

ایمونوبلاتینگ، 18 نفر(7/25 درصد) از بیماران مبتلا به آسم IgE  اختصاصی نسبت به آلرژن های قارچ آلترناریا

آلترناتا نشان دادند. با روشSDS-PAGE  ، 21باند در عصاره قارچی شناسایی شد. بعد از بلاتینگ،12 باند با وزن

های مولکولی ۱۱تا 83 کیلودالتون شناسایی شد که با IgE اختصاصی سرم بیماران واکنش نشان دادند. اجزاء واکنش دهنده

با IgE عبارت بودند از: 11، 22،16، 26، 30، 32،  38، 45، 57، 67، 70، 83  کیلودالتون. دراین میان

باندهای  26، 30، 16، 22، 11، 57 کیلودالتون پاسخ بیشتری داشته و به ترتیب با  9/88، 7/66، 1/61، 50،

4/44، 4/44  درصد از سرم های بیماران مبتلا به آسم پاسخ دادند. دربین این باندها، باندهای 26، 30، 16 و 22

کیلودالتون بیشترین فراوانی باند شدن به IgE اختصاصی ضد آلترناریا آلترناتا را نشان دادند و به عنوان آلرژن های غالب

شناسایی گردیدند.

نتیجه گیری: آلرژن های قارچ آلترناریا آلترناتا در ایجاد واکنش های آلرژیک در بیماران مبتلا به آسم موثر است. باندهای

آلرژنی به دست آمده بعد از بلاتینگ 12 باند بود که باندهای 26، 30، 16 و 22 کیلودالتونی بیشترین فراوانی را در

بین بیماران نشان دادند. بر اساس نتایج حاصل، شناسایی آلرژن های قارچ آلترناریا آلترناتا می تواند پایه ای برای استاندارد

سازی عصاره های آن و استفاده از آنها در انجام تست های آلرژی باشد.